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LipoJet2000 Transfection Reagent

货号:PC-99032
厂家:PCM(PlantChemMed)
  • 介绍
  • 补充信息
  • 说明书

    lipoJet2000转染试剂是一种多用途转染试剂,可在各种贴壁和悬浮细胞系中提供高效转染。lipoJet2000转染试剂可转染siRNA、shRNA、质粒DNA等

     以转染六孔板的贴壁细胞为例:

    1,接种细胞。转染前一天将细胞接种至六孔板内。细胞接种数量视其生长速度而定,一般为1×106个细胞。转染时要求细胞汇合度为90~95%。转染前两小时对细胞进行换液。

    2,将4ug的质粒DNA加至250ul的OPTI-MEM培基中,混匀。

    3,将10ul的LipoJet2000加至另外250ul 的OPTI-MEM中,轻轻混匀,室温静置5分钟。

    4,将DNA悬液和LipoJet2000悬液混合,总体积500ul,轻轻混匀,室温静置20分钟。

    5,将DNA和LipoJet2000混合液加至六孔板的孔内,前后左右晃动孔板混匀,置于培养箱中培养。

    6,转染4-6小时后,细胞换液,每孔2ml培基。

    7,转染18-48细胞后,收集细胞检测表达,或加入抗性培基筛选稳定表达克隆。

    注: 1. 如果没有OPTI-MEM培基,用培养细胞的无血清基础培基替代也可以。

        2. 该说明为一个孔的用量,同时转几个孔时按需加倍。若转染其他类型孔板,DNA和LipoJet2000用量参见试剂盒说明书中的表格。可根据实际质粒和细胞的转染效率,分不同量摸索最佳DNA和LipoJet2000的混合比例。

           3.转染4-6小时后也可以不换液,但由于LipoJet2000具有一定的细胞毒性,作用时间过长可能使某些细胞出现大量死亡现象,建议换液。

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